Aumento del daño en el ADN y estrés oxidativo en espermatozoides de pacientes con oligozoospermia idiopática y antecedentes de criptorquidismo / Extent of sperm DNA damage in spermatozoa from men examined for infertility. Relationship with oxidative stress

Background: Cryptorchidism and oligozoospermia are clinical conditions closely associated with impaired fertility. Oxidative stress and related sperm DNA damage have been identified as significant causes of male infertility. Aim: To determine the extent of sperm nuclear DNA damage in patients affected with idiopathic oligozoospermia or undescended testes and to examine its relationship with oxidative stress. Patients and methods: We studied 20 patients with idiopathic oligozoospermia and 18 with undescended testes (who previously underwent orchiopexy) and 25 normozoospermic healthy controls. All subjects underwent semen analysis. Sperm DNA damage was evaluated by the sperm chromatin structure assay/flow cytometry (SCSA-FCM) and by the dUTP-biotin nick end labeling (TUNEL) assay. Levels of reactive oxygen species (ROS) and total antioxidant capacity (TAC) were assessed by a chemiluminescence assay. Results: DFI (percentage of sperm with denatured DNA) values and percentage of TUNEL positive cells were significantly greater in patients with oligozoospermia (DFI: 28.8±5.6; TUNEL+: 26.9±3.0) or cryptorchidism (DFI: 26.4±10.1; TUNEL+: 29.1±3.9), compared with controls (DFI: 7.1±0.9; TUNEL+: 14.2±1.2). Similarly, both groups of patients had significantly higher (p <0.01) levels of ROS. TAC levels did not differ between control and patient groups, suggesting that the DNA damage occurs before spermiation. Conclusions: Sperm DNA damage is significantly increased in men with idiopathic oligozoospermia and in cryptorchid subjects. The finding of increased ROS levels may indicate that seminal oxidative stress may be involved in the pathogenesis of sperm DNA damage in these patients.

Contribución de las anomalías cromosómicas ovocitarias en el fracaso de la fecundación humana in vitro / Contribution of chromosomal abnormalities to in vitro fertilization failures

Background: Present knowledge of mechanisms involved in human fertilization has uncovered a new group of pathologic conditions that have been generically named fertilization abnormalities. Aim: To determine the contribution of chromosomal alterations to in vitro fertilization failures. Material and methods: A cytogenetic analysis of oocytes that were not fertilized after insemination with normal spermatozoa. Oocytes were obtained from patients subjected to in vitro fertilization in a public hospital of Metropolitan Santiago. Ovulation was induced in these patients administering GnRh-a, FSH, HMG and HCG. The double fixation technique described by Wramsby was used to obtain chromosomes. Results: One hundred and seven oocytes coming from 45 women aged 25 to 42 years old were studied. The frequency of aneuploidy in these oocytes was 37.3 percent, with a 11.8 percent of hypohaploidy, a 21.6 percent of hyperhaploidy and a 3.9 percent of diploid oocytes. In hyperhaploid as well as in hypohaploid oocytes, the chromosomes involved in aneuploidy pertained to groups D and G. Conclusions: Although the total frequency of aneuploidy is within normal ranges, the frequency of hyperhaploidy is superior to previous reports. An explanation for this finding could be that the occurrence of a lack of disjunction with chromosomal retention in the parental cell occurs with a higher frequency than that in which the chromosomes are retained in the polocyte. We also suggest that oocyte chromosomal aneuploidy could contribute to the failure of in vitro fertilization procedures (

Significado fisiopatológico de las especies reactivas del oxígeno en la infertilidad masculina / Physiopathological meaning of the reactive oxygen species in male infertility

La producción de especies reactivas del oxígeno (EROs) por los espermatozoides humanos, ha sido implicada en la etiología de la infertilidad masculina, asociada con la pérdida de la función de la membrana plasmática inducida por procesos de peroxidación lipídica. Con el propósito de establecer el significado fisiopatológico de las especies reactivas del oxígeno en el análisis diagnóstico de la infertilidad masculina, los objetivos de este estudio fueron determinar y comparar la producción de especies reactivas totales y los índices lipoperoxidativos (LPO) de los espermatozoides, en muestras seminales de varones fértiles, varones de parejas sometidas al procedimiento de FIV-TE, y pacientes referidos a un centro de infertilidad. En cada muestra se determinaron los parámetros bioquímicos asociados a la actividad prooxidativa: índices quimioluminicencia. La competencia funcional de los espermatozoides fue determinada a través del test hipoosmótico y de la fecundación in vitro homóloga. Los niveles más elevados de peroxidación lipídica se encontraron asociados con una disminución de la motilidad (AS) y de la motilidad y morfología (AS-T). Al analizar el efecto del estrés oxidativo sobre el índice de LPO, se observó un incremento significativo en el contenido de TBARS en los grupos N, As y AS-T. El grupo fértil, por el contrario, demostró una menor sensibilidad frente al estrés oxidativo. Niveles elevados de TBARS (> 10,0 nmol/10 8 esp) se observaron en el 44 por ciento de las muestras de AS y en el 75 por ciento de las AS-T. En presencia de niveles elevados de LPO, el test-HOS se presentó invariablemente alterado. En conclusión, nuestros resultados demuestran que el espermatozoide humano es profundamente susceptible a la presencia de EROs, particularmente en algunas situaciones clínicas, y constituyen una nueva evidencia del significado clínico que las EROs tienen sobre el potencial fecundante del espermatozoide y su impacto en la fertilidad del varón

Variabilidad del análisis seminal y de los parámetros objetivos del movimiento espermático en semen y durante la capacitación espermática en individuos con fertilidad probada / Variability of semen analysis and of objective parameters of sperm motion in semen and during sperm capacitation in males with probed fertility

Estudiamos la variabilidad de los parámetros seminales y del movimiento objetivo espermático en semen y a las 2 horas de capacitación a través de métodos computacionales en individuos con fertilidad probada. Analizamos la variabilidad intraindividuo en 20 hombres y la variabilidad interindividuo en 80 donantes fértiles. El 12,5 por ciento de la población estudiada presentó oligospermia pura sin otra alteración del espermiograma. Sus parámetros de movimiento celular fueron comparables a la población de donantes normospérmicos. En semen, la concentración espermática fue la que presentó mayor variación tanto intra como interdonante y la menor variación se observó para el porcentaje de motilidad y el porcentaje de formas normales. Del estudio de los parámetros objetivos del movimiento espermático destaca una menor variabilidad intra e inter donante durante la capacitación espermática comparado con el semen. Estos datos sugieren que la evaluación del movimiento espermático a las 2 horas de capacitación podría ser un método útil, adicional al espermiograma en la evaluación del potencial de fertilidad masculino